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cytotech公司品牌代理

產(chǎn)品型號:
更新時間:2024-03-06
廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
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產(chǎn)品簡介:
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產(chǎn)品價格:詢價
用產(chǎn)品只提供給進一步的科研使用,不可應用于治療等其他方面。
目前, 利用微載體系統(tǒng)進行組 織工程細胞的大規(guī)模 培養(yǎng)受到醫(yī)學 科研人員青 睞, 而且其研究發(fā)展非常迅速, 已成功利用該技術(shù) 進行了肝細胞、 成纖維細胞、 生肌細胞、 軟骨細胞 [ 19 220] 等細胞系的大規(guī)模培養(yǎng) 。
4. 2 微載體培養(yǎng)的優(yōu)點 微載體培養(yǎng)一定程度上克服了zui初的轉(zhuǎn)瓶培 養(yǎng)的不足, 具有很多優(yōu)點 :
( 1) 兼具單層培養(yǎng) 和懸浮培養(yǎng)的優(yōu)勢, 且是均相培養(yǎng);
( 2) 細胞所處 環(huán)境均一;
( 3) 環(huán)境條件( 溫度、 和 CO2 等) 容易 pH 測量與監(jiān)控;
( 4) 具有較高的比表面積;
( 5) 培養(yǎng)操 作可系統(tǒng)化、 自動化, 降低了污染發(fā)生的機會。
4. 3 微載體培養(yǎng)步驟
1) 選擇合適的微載體類型。為了獲得zui高產(chǎn) 量的細胞, 先用少量幾種微載體做細胞培養(yǎng)試驗, 在一定時間內(nèi)計算細胞貼壁率和細胞數(shù), 并繪制 成曲線, 比較細胞容納量、 微載體用量、 攪拌速度, 由此選出適當?shù)奈⑤d體。
2) 浸泡水化及消毒。在玻璃容器內(nèi)加入適量 的微載體, 按一定的比例加入無 Ca 2+ 、 2+ 的磷 Mg 酸緩沖液( PBS) 浸泡 3 h 以上, 輕輕攪動, 然后加 入 1/ 2 的新鮮 PBS 再洗 1 次。微載體的濃度一般 按 3 mg/ 100 mL 配 制, 攪 拌 速 度 控 制 在 50~ 70 r/ min。
3) 接種。根據(jù)細胞類型決定接種濃度。
4) 培養(yǎng)觀察與細胞計數(shù)。在顯微鏡下直接觀 察微載體上細胞的生長情況, 將微載體上的細胞 消化后計數(shù)并計算其濃度。
5) 消化。傳代培養(yǎng)或收獲細胞均需使細胞脫 離微載體, 通常采用酶消化法。
6) 分離細胞。對于回收率要求不高的細胞種類分組沉降簡單易行, 而若要求高回收率, 則可用 過濾方法, 采用 100 Lm 孔徑的尼龍網(wǎng)、 不銹鋼網(wǎng)、 多孔玻璃濾器等將細胞與微載體分離開。
7) 傳代培養(yǎng)。微載體上分離后的細胞可進一 步做微載體傳代培養(yǎng)。
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