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粒細(xì)胞-巨嗜細(xì)胞集落刺激因子ELISA試劑盒
產(chǎn)品簡介:

粒細(xì)胞-巨嗜細(xì)胞集落刺激因子ELISA試劑盒用于定量檢測GM-CSF濃度。GM-CSF是重要的造血生長因子和免疫調(diào)節(jié)劑,調(diào)節(jié)粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的增殖分化。采用雙抗體夾心ELISA法,適用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清等樣本。

產(chǎn)品型號:

更新時(shí)間:2026-03-09

廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家

訪問量:433

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粒細(xì)胞-巨嗜細(xì)胞集落刺激因子ELISA試劑盒

粒細(xì)胞-巨嗜細(xì)胞集落刺激因子ELISA試劑盒(Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor ELISA Kit, GM-CSF ELISA Kit),是基于酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)原理研發(fā)的科研專用檢測試劑盒,可特異性檢測相關(guān)樣本中粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)及相關(guān)信號通路分子的含量,也可用于相關(guān)樣本中該因子的表達(dá)水平監(jiān)測、功能研究及藥物干預(yù)效果評估,經(jīng)特異性驗(yàn)證、靈敏度測試及重復(fù)性實(shí)驗(yàn)確認(rèn),無交叉反應(yīng),檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠,無試劑降解、雜菌污染等問題。GM-CSF是一種重要的造血生長因子及免疫調(diào)節(jié)因子,主要由活化的T細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞分泌,核心功能是調(diào)控粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的增殖、分化與成熟,同時(shí)參與免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)及組織修復(fù),其表達(dá)異常與感染性疾病、自身免疫性疾病、腫瘤及造血功能障礙等密切相關(guān),廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、血液學(xué)、腫瘤學(xué)、感染病學(xué)等領(lǐng)域,是評估該因子功能、表達(dá)水平及藥物干預(yù)效果的重要研究工具,可用于驗(yàn)證藥物對GM-CSF表達(dá)的調(diào)控作用及相關(guān)疾病發(fā)病機(jī)制研究。本試劑盒核心特征是特異性強(qiáng)、操作便捷、檢測快速,可精準(zhǔn)定量相關(guān)指標(biāo)含量,廣泛應(yīng)用于科研實(shí)驗(yàn)室、生物制品研發(fā)機(jī)構(gòu),是科研領(lǐng)域核心的GM-CSF相關(guān)檢測工具。

檢測原理

本試劑盒的核心檢測原理,基于酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)的雙抗體夾心法,聚焦GM-CSF及相關(guān)檢測指標(biāo)的抗原抗體特異性結(jié)合特性,結(jié)合該因子檢測的精準(zhǔn)需求設(shè)計(jì),契合ELISA技術(shù)的核心原理與操作規(guī)范:試劑盒預(yù)先將GM-CSF特異性捕獲抗體包被于酶標(biāo)板上,加入待檢測樣本(細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液、組織勻漿、血清、血漿等)后,樣本中的GM-CSF會(huì)與酶標(biāo)板上的捕獲抗體特異性結(jié)合,形成抗原-抗體復(fù)合物;洗滌去除未結(jié)合的雜蛋白、細(xì)胞碎片、無關(guān)細(xì)胞因子及其他雜質(zhì)后,加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體,與復(fù)合物特異性結(jié)合,形成“捕獲抗體-GM-CSF-酶標(biāo)檢測抗體"的三明治結(jié)構(gòu);再加入底物液(TMB),HRP催化底物發(fā)生顯色反應(yīng),顯色強(qiáng)度與樣本中GM-CSF的含量呈正相關(guān),通過酶標(biāo)儀在450nm主波長(參比波長630nm)下測定吸光度(OD值),對照標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計(jì)算出樣本中該因子的具體含量。檢測流程規(guī)范:樣本采集后需及時(shí)處理(細(xì)胞培養(yǎng)上清離心分離、細(xì)胞裂解液制備、組織勻漿研磨離心、血清/血漿無菌分離),按照試劑盒說明書稀釋樣本;酶標(biāo)板平衡至室溫后,依次加入標(biāo)準(zhǔn)品、樣本及空白對照,37℃孵育30分鐘;洗滌5次后加入酶標(biāo)二抗,37℃孵育20分鐘;再次洗滌5次后加入底物液,37℃避光孵育15分鐘;加入終止液終止反應(yīng),10分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀測定OD值,計(jì)算檢測結(jié)果,全程約2.5小時(shí),確保檢測的可重復(fù)性與準(zhǔn)確性。

產(chǎn)品特點(diǎn)

本產(chǎn)品針對GM-CSF檢測需求優(yōu)化制備,核心特點(diǎn)如下:

1.  特異性優(yōu)異:采用針對GM-CSF的高特異性單克隆抗體,可特異性結(jié)合樣本中的目標(biāo)因子,不與其他造血生長因子、細(xì)胞因子及雜蛋白發(fā)生交叉反應(yīng),檢測特異性>99%,確保檢測結(jié)果精準(zhǔn),有效規(guī)避相關(guān)檢測中的干擾因素,同時(shí)可有效區(qū)分該因子的真實(shí)表達(dá)水平與假陽性信號,適配免疫、血液相關(guān)樣本檢測的特異性需求;

2.  質(zhì)控嚴(yán)格:每批次試劑盒均通過靈敏度、重復(fù)性、特異性及穩(wěn)定性檢測,附完整QC報(bào)告,確保批內(nèi)變異系數(shù)(CV)<8%、批間變異系數(shù)(CV)<10%,檢測靈敏度可達(dá)0.08ng/mL,符合科研標(biāo)準(zhǔn),可精準(zhǔn)監(jiān)測樣本中GM-CSF的微量表達(dá)變化,助力該因子功能研究及藥物干預(yù)效果評估,保障檢測數(shù)據(jù)的可靠性;

3.  操作便捷:試劑盒含全套預(yù)配試劑(包被酶標(biāo)板、標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)二抗、底物液、終止液、濃縮洗滌液等),無需額外配制核心試劑,步驟簡化,全程可在2.5小時(shí)內(nèi)完成,適配常規(guī)細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室操作,新手易上手,節(jié)省科研時(shí)間成本;

4.  樣本兼容廣:可適配細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液、組織勻漿、血清、血漿等核心樣本類型,樣本用量少(僅需50μL/孔),無需復(fù)雜預(yù)處理,僅需簡單離心、稀釋即可檢測,適配免疫細(xì)胞功能研究、炎癥檢測、造血功能相關(guān)實(shí)驗(yàn)等多場景樣本需求,覆蓋該因子相關(guān)研究的主要樣本類型;

5.  適配場景廣:可用于GM-CSF表達(dá)水平監(jiān)測、造血調(diào)控機(jī)制研究、免疫應(yīng)答及炎癥反應(yīng)相關(guān)研究、感染性疾病及自身免疫性疾病發(fā)病機(jī)制研究、相關(guān)藥物篩選,適配免疫學(xué)、血液學(xué)、腫瘤學(xué)、感染病學(xué)等多領(lǐng)域科研需求,貼合該因子的核心生物學(xué)功能及病理關(guān)聯(lián)應(yīng)用場景。

適用樣本類型

本試劑盒適配GM-CSF相關(guān)的體外科研檢測,適用樣本類型明確及處理要求如下:細(xì)胞培養(yǎng)上清樣本(對數(shù)期免疫細(xì)胞/內(nèi)皮細(xì)胞上清,12000rpm離心5分鐘,去除細(xì)胞碎片,適用于分泌型GM-CSF檢測);細(xì)胞裂解液樣本(無菌收集免疫細(xì)胞/內(nèi)皮細(xì)胞,用RIPA裂解液(含蛋白酶抑制劑)裂解,離心取上清,適用于細(xì)胞內(nèi)GM-CSF及信號通路分子檢測);血清樣本(靜脈采血,室溫靜置后離心,避免溶血,4℃短期保存,適用于體內(nèi)該因子表達(dá)水平及疾病相關(guān)檢測);血漿樣本(抗凝采血,離心分離,4℃冷藏運(yùn)輸,適用于體內(nèi)GM-CSF快速檢測);組織勻漿樣本(取新鮮組織,研磨后用PBS勻漿,離心取上清,適用于組織中該因子的表達(dá)分析)。推薦檢測體系:使用試劑盒配套酶標(biāo)板,酶標(biāo)儀需具備450nm/630nm雙波長功能;樣本稀釋比例為培養(yǎng)上清1:5、細(xì)胞裂解液1:10、組織勻漿1:8、血清/血漿1:3(可根據(jù)實(shí)際濃度調(diào)整),標(biāo)準(zhǔn)品濃度梯度為0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6ng/mL,參考區(qū)間以說明書為準(zhǔn),標(biāo)準(zhǔn)曲線采用優(yōu)化后的4參數(shù)邏輯(4PL)模型擬合,提升定量準(zhǔn)確性。(具體樣本處理方法請參考產(chǎn)品說明書,免疫細(xì)胞/內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)需遵循常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)范,推薦使用含10%胎牛血清及雙抗的RPMI-1640/DMEM培養(yǎng)基,可添加適宜刺激因子誘導(dǎo)GM-CSF分泌,培養(yǎng)條件為37℃、5%CO?,定期觀察細(xì)胞形態(tài)、增殖狀態(tài)及GM-CSF表達(dá)相關(guān)表型;凍存液建議為95%培養(yǎng)液+5%DMSO,液氮保存,低代次細(xì)胞可更好維持該因子的正常分泌功能)

儲(chǔ)存與注意事項(xiàng)

1.  試劑盒需全程2-8℃避光冷藏儲(chǔ)存,嚴(yán)禁-20℃冷凍或常溫放置,避免溫度波動(dòng)導(dǎo)致試劑降解、抗體活性喪失,尤其注意保護(hù)酶標(biāo)抗體的催化活性與抗原抗體的特異性結(jié)合能力,防止影響GM-CSF的檢測準(zhǔn)確性;

2.  標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)二抗等試劑開封后,密封冷藏保存,1個(gè)月內(nèi)用完,GM-CSF標(biāo)準(zhǔn)品避免反復(fù)凍融,防止其蛋白結(jié)構(gòu)破壞、活性喪失,底物液需避光保存,避免提前顯色影響檢測結(jié)果;

3.  樣本采集后及時(shí)處理,相關(guān)細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞裂解液冷藏24小時(shí)內(nèi)完成檢測,血清、血漿、組織勻漿冷藏或-20℃短期保存,48小時(shí)內(nèi)完成檢測,避免樣本變質(zhì)、目標(biāo)因子降解,細(xì)胞樣本需新鮮采集,避免細(xì)胞活力下降、因子分泌異常影響檢測結(jié)果,確保樣本中該因子的完整性與活性;

4.  操作時(shí)嚴(yán)格遵循無菌規(guī)范,佩戴防護(hù)用品,避免試劑、樣本接觸皮膚黏膜;檢測過程中控制孵育溫度與時(shí)間,洗滌充分,避免未結(jié)合試劑殘留導(dǎo)致結(jié)果偏差,穩(wěn)健的洗滌步驟是降低背景信號、提升檢測準(zhǔn)確性的關(guān)鍵;

5.  底物液具有潛在刺激性,終止液為酸性溶液,操作時(shí)需謹(jǐn)慎,避免接觸衣物與皮膚,檢測完成后按生物安全規(guī)范處理廢棄試劑與酶標(biāo)板;

6.  相關(guān)樣本需無菌采集與處理,細(xì)胞裂解液需充分裂解細(xì)胞,離心去除細(xì)胞碎片及雜質(zhì)后再進(jìn)行檢測,避免雜質(zhì)干擾檢測結(jié)果,尤其注意去除樣本中無關(guān)細(xì)胞因子的干擾;培養(yǎng)上清需在細(xì)胞對數(shù)期或刺激誘導(dǎo)后采集,避免細(xì)胞凋亡釋放的蛋白酶導(dǎo)致目標(biāo)因子降解,同時(shí)避免培養(yǎng)體系中血清濃度過高影響檢測準(zhǔn)確性,藥物干預(yù)實(shí)驗(yàn)中需設(shè)置空白對照與陰性對照,排除藥物本身對顯色反應(yīng)的干擾,確保檢測結(jié)果的可靠性。

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